Menü
Általános tudnivalók:
A hallgatóknak felkészülten kell érkezniük a gyakorlatra, otthon előre elkészített (kézzel vagy géppel írt) elméleti bevezetővel (maximum 1 oldal), továbbá magukkal hozzák az ’Egyéb feladatok’ fájlt elektronikus vagy nyomtatott formában (ezen feladatok megoldását a gyakorlat során a hallgatók megbeszélik a gyakorlatvezetővel). Érdemes továbbá beírni a jegyzőkönyvbe (vagy kinyomtatni előre) a gyakorlat során elvégzendő feladatot is.
A gyakorlatok menetrendje:
• 20 perces ZH írást követően a gyakorlatvezető ellenőrzi a jegyzőkönyvek (otthon elkészített) elméleti bevezetőjét és a ZH-kat. A jegyzőkönyv elméleti részének teljes hiánya és/vagy elégtelen ZH esetén a hallgató nem teljesítheti tovább a gyakorlatot, ebben az esetben elégtelen gyakorlati jeggyel távoznia kell - (30 perc)
• A gyakorlatvezető ismerteti a kapilláris elektroforézis módszerének elméleti hátterét, a CE készülék felépítését, a használt kapillárisokat, szoftvert. A hallgatóknak lehetőségük nyílik kipróbálni a kapilláris méretre vágását, a detektorablak kialakítását, a szoftver használatát – (60 perc)
• Számolási feladatok, egyéb feladatok megbeszélése – (30 perc)
• Mintaelőkészítési műveletek elvégzése a gyakorlatleírás alapján – (30 perc)
• Az előkészített minták mérése, a mérési eredményeket a hallgatók és a gyakorlatvezető közösen megbeszélik – (90 perc, melyből ~50 perc szünet)
• Referálás a CE elméletéből és gyakorlatából: a hallgatók néhány kérdést kapnak szóban a gyakorlat témakörével kapcsolatban, amikre adott válaszok alapján a gyakorlatvezető felméri a hallgatók felkészültségét, tudását. A referálásra a hallgatók jegyet kapnak, mely jegy 1/3-ad súllyal számít bele a gyakorlati jegy kialakulásába - (hallgatóként ~5 perc)
• A hallgatók a jegyzőkönyveiket legkésőbb a gyakorlatot követő munkanapon kell leadják. A jegyzőkönyv határidőig történő leadásának elmulasztásával a hallgató gyakorlata elégtelen. A gyakorlatvezető a jegyzőkönyveket legkésőbb 2 munkanapon belül kijavítja.
• A hallgatóknak a jegyzőkönyveiket önállóan kell elkészíteniük! Amennyiben a jegyzőkönyvét – akár csak egy részét is - a hallgató társáról másolja, mindkettejük gyakorlati jegye elégtelen lesz.
Időbeosztás (2x1x4 fő):
Időtartam (óra) |
Tevékenység |
0.5 |
ZH |
1.5 |
bevezető, készülék ismertetés, feladatok ismertetése |
0.5 |
mintaelőkészítés |
1.5 |
minták mérése, kiértékelése, diszkusszió |
0.5 |
referálás |
1.5 |
kiértékelés, diszkusszió, jegyzőkönyv elkészítése egyénileg (otthon) |
6 |
|
Mérési körülmények (zárójelben egy második – short-end - módszer körülményei):
· Puffer: 20 mM borát, pH=9,4
· Kapilláris: leff= 56 cm (ill. leff= 10 cm), belső átmérő= 50 μm
· Injektálás: 100 mbar∙s (ill. -100 mbar∙s)
· Hőmérséklet: 25°C
· Feszültség: +25 kV (ill. -25 kV)
· Detektálás: 200 nm
Minták:
1. Benzoesav, szalicilsav és acetil-szalicilsav tartalmú, ismeretlen koncentrációjú oldat
2. 4 db oldat, melyek ismert koncentrációban tartalmazzák az acetilszalicilsavat és a benzoesavat
3. Ismeretlen minta (acetilszalicilsav vagy benzoesav)
Feladat:
A hallgatóknak a mintaelőkészítés során el kell készíteni ismert koncentrációjú törzsoldatokból a háromkomponensű mintát (1. minta) és a kalibrációhoz szükséges 4 db benzoesav oldatot.
A gyakorlat során két eltérő módszerrel analizáljuk a 3 komponenst tartalmazó 1. mintát (’long-end’, ill. ’short-end’ injektálással). A két módszer közti különbségek tárgyalása után az alkalmasabbnak vélt módszerrel megmérjük a kalibráló oldatsort és az energiaitalt is.
Gyakorlathoz kapcsolódó feladatok:
1. A benzoesav, szalicilsav és acetil-szalicilsav migrációs időinek megadása mindkét módszer esetén.
2. Kalibrációs egyenes szerkesztése 4 db pontosan ismert koncentrációjú benzoesav oldat mérésével, az egyenes egyenletének megadása.
3. Az ismeretlen minta minőségi és mennyiségi meghatározása a kapott eredmények alapján.
Lehetséges feladatok, kérdések a ZH-ban:
Ajánlott irodalom:
Előadás képanyaga (pdf)
(Agilent oktatóanyag)
Kiértékelés (pdf)
2018.10.03. 8 órai csoport elektroferogramjai
2018.10.03. 10 órai csoportok elektroferogramjai
Törzsoldatok koncentrációi:
- Acetilszalicilsav: 442 µg/mL
- Szalicilsav: 134 µg/mL
- Benzoesav: 334 µg/mL