Menü
A gyakorlat programja (2x10x4):
|
Időtartam (óra) |
Tevékenység |
|
0.5 |
ZH |
|
0.5 |
bevezető, eszközök, feladatok ismertetése |
|
2.5 |
elemzések (4 féle + előhívások) |
|
1.5 |
kiértékelés, diszkusszió, jegyzőkönyv elkészítése egyénileg (otthon) |
|
5 |
|
5.2. Édesköményolaj vizsgálata
Minta: kereskedelmi édeskömény illóolaj oldata
Réteg: szilikagél 60 F254
Eluens: 4-5 ml diklór-metán
Felcseppentés: ugyanazzal a kapillárissal a pontokba 1, 2, 3, 4, ill. 5 (az első pontra 1 csepp, a második pontba 2 csepp, a harmadikba 3 csepp és így tovább…) lehetőleg egyforma, pici csepp. A cseppentések között és a futtatás előtt száradjon meg a minta a rétegen!
Előhívás: UV-254 nm fénnyel megvilágítás
A gőztér telítése érdekében a szűrőpapír csíkkal kibélelt futtatókádba az eluenst öntjük először, majd lefedjük azt és legalább 5 perc elteltével tesszük bele az elkészített réteget. Futtatás után a réteget kivesszük a kádból, bejelöljük az oldószerfrontot (ceruzával, szabad kézzel) (gyorsan párolog a diklór-metán!!) és hajszárítóval megszárítjuk a réteget.
A kiértékeléshez a fényképet az UV fény alatt készítjük el.
A jegyzőkönyvben egy terület-cseppszám görbét kell elkészíteni (x tengely: cseppek száma; y tengely: foltok területe). Lineáris-e a görbe? Ha nem, mi lehet ennek az oka?
5.5. Aminosavak elválasztása cellulóz rétegen
Minta: 0,66 %-os alanin, triptofán, lizin, prolin, izoleucin + 1db ismeretlen oldat (kétkomponensű)
Réteg: cellulóz
Eluens: butanol : metanol : víz = 10 : 4 : 5
Az eluens össztérfogata 5 ml legyen: 2,6 ml butanol + 1 ml metanol + 1,3 ml víz.
Felcseppentés: a réteg aljától 1 cm-re 1-1 pici csepp (Futtatás előtt a réteget szárítsuk meg!)
Előhívás: 0,2 %-os ninhidrinnel beszórás, majd melegítés hajszárítóval kb. 5 percig FÜLKE ALATT!
A gőztér telítésétől eltekintünk.
A minták felcseppentése után hagyjuk megszáradni a réteget, akár hajszárítóval is száríthatunk rajta, ellenkező esetben a minták leoldódnak az eluensbe!
A megfuttatott réteget kivesszük a kádból, bejelöljük az oldószerfrontot, megszárítjuk hajszárítóval. Majd fülke alatt alaposan beszórjuk az előhívószerrel és hosszabb ideig melegítjük hajszárítóval. A ninhidrinnel az aminosavak lila terméket képeznek, kivéve a prolint, ami sárga foltot ad az előhívás után. Mi az oka?
A jegyzőkönyvben meg kell adni az ismeretlen oldat két komponensét az Rf értékek alapján.
5.8. Ételfestékek elválasztás papírkromatográfiával
Minta: E102, E122, E131 ételfestékek oldatai + ismeretlen oldat (kétkomponensű)
Réteg: Whatman kromatográfiás papír 3MM CHR
Eluens: butanol : metanol : víz = 10 : 4 : 5
Az eluens össztérfogata 5 ml legyen: 2,6 ml butanol + 1 ml metanol + 1,3 ml víz.
Felcseppentés: a réteg aljától 1 cm-re 1-1 pici csepp
A gőztér telítésétől eltekintünk.
A réteget futtatás után kivesszük a kádból, bejelöljük az oldószerfrontot, majd hajszárítóval megszárítjuk. Az eredményt szabad szemmel is láthatjuk, nincs szükség előhívásra.
Feladat: az ismeretlen két komponensének meghatározása az Rf értékek alapján.
Kiértékelés:
Az eredményeket egy mobiltelefon lehetőleg nagyfelbontású kamerájával kell lefotózni és a készített képeket az ingyenesen letölthető CP Atlas 2.0 szoftverrel kiértékelni.
A jegyzőkönyvbe a kiértékelés lépéseinek be kell kerülnie, nem elegendőek csak a meghatározott terület, Rf értékek!
ZH kérdések:
A CP-Atlas letölthető, használati útmutató az oktatási segédanyag 36-41 oldalán található.